肺科和呼吸研究杂志

ISSN：2639-9954

研究文章

从健康供体和某些疾病患者获得的整个非稀释人血的光子尿布的特殊性

Kirill N Novikov^1*，Vladimir L Voeikov¹，ekaterina v buravleva¹和Nadezhda g Berdnikova²

¹MV Lomonosov莫斯科大学生物学学院，俄罗斯莫斯科
²I.M.Sechenov第一莫斯科医学州立大学，俄罗斯莫斯科

*通讯地址：诺维科夫kn。MV Lomonosov莫斯科大学生物学学院，俄罗斯莫斯科，电话：+7（495）939 I2 68；电子邮件：kirniknov@yandex.ru

日期：提交：2018年12月24日;得到正式认可的：2018年12月28日;发布：2018年12月31日

如何引用本文：Novikov KN，Voeikov VL，Buravleva EV，Berdnikova ng。从健康的供体和某些疾病患者获得的整个非稀释人血的光子胚芽的特殊性。J肺醇呼吸。2018;2：013-019。doi：10.29328/journal.jprr.1001009

版权许可证：©2018 Novikov KN等。这是根据Creativ金博宝app体育e Commons归因许可分发的开放访问文章，该文章允许在任何媒介中不受限制地使用，分发和复制，前提是适当地引用了原始作品。

关键字：全部未稀释的血液；化学发光；光子发射；Luminol;Lucigenin;呼吸爆发；活性氧；非辐射能量转移；心绞痛;慢性阻塞性肺疾病。

血液是大多数脊椎动物以及许多无脊椎动物物种的吸收，转移和转移到氧气和组织中最重要的功能。在本身中，不断发生细胞和非细胞成分之间的许多相互作用。在这些相互作用中的特殊作用属于红细胞和白细胞，在这种相互作用之间不断地交换和激活氧气，我们直接在全血中表现出来。血液是一种液体组织，它是一个复杂的合作系统，其最重要的特性是维持人体体内平衡的能力。直接反映活性氧（ROS）在血液中各种调节功能中的重要性。我们的经验表明，尽管具有高度密度，但人类和动物的未稀释血液可能是由于EEE态的转化而成为辐射的来源，并且由于整个血液系统中发生的次要过程而产生的。该辐射的参数 - 血液中的UWPE取决于其生理特性，并反映了供体的生理状态。从非稀释血液中对UWPE的分析是一种简单而敏感的方法，可以监测患者的治疗过程。尽管非稀释的血液不透明度高，在存在和不存在UWPE增强子的情况下，它可能是UWPE的强大来源。来自血液的UWPE的模式认为ROS在其中连续产生，特别是在存在辐射激活蛋白（LC）的情况下注册的。 Analysis of patterns of UWPE from blood reveals its highly non-linear, stable non-equilibrium and cooperative properties, characteristic of a living system [1,3].

健康供体和不同疾病患者的血液通过静脉穿刺获得，并被肝素稳定。血液在9.00至10.00 a之间获得。m。并在渗出后精确使用。在此期间，它被保存在20-25的塑料管中^oC。

该研究得到医院医学伦理委员会（莫斯科市临床医院N23«Medsantrud»）的批准，所有患者均给予了知情同意。

记录化学发光（CL） - UWPE的方法

使用CL的方法，研究了患者和健康供体的未稀释全血的活性氧（ROS）状态。UWPE使用两种不同类型的单个光子计数器进行了注册。在第一个实验中，第一个是液体闪烁计数器Mark-II（美国核 - 芝加哥），配备了光电层状EMI 9750QB/I。它以最大增益以单光子计数（一致回路）的方式使用。测量在室温（I9-2I°C）下进行。黑暗计数在20-40/秒的范围内变化。

标准的硼合型玻璃小瓶或1 ml eppendorf聚乙烯试管用作血容器。测试管始终在一个和相同的位置中固定在空玻璃小瓶中。选择了插入计数室后的小瓶和测试管较低的背景计数和短衰减时间。血液中CL的参数不取决于小瓶的材料。将血液（0.2-i.0 mL）添加到小瓶或试管中，其计数率/0.2分钟注册2-3分钟，并将Luminol（LM）（Sigma）（Sigma）添加到血液样本中分析级二甲基亚氧化二甲基二甲基溶液（10-1 m）的最终浓度10-4 m。

第二个光子计数器是化学符号计“ Biotoks-7a”（俄罗斯）（图1）。

该设备配备了水平光电乘数（PM）作为单个光子计数器（9750QB / 1 pm，EMI Electronics Ltd，Middlesex，UK，UK），频谱敏感性区域为380-710 nm，最大值为蓝绿色区域为420-500 nm。将血液（100 µL）的等分试样置于Eppendorf型试管中，然后加入Lucigenin（LC）（最终浓度 - 10-4 m），并测量CL动力学300秒，每秒进行光子计数。数据表示为每秒的光子计数，而光总和为300秒的动力学CL曲线的积分。结果是在统计和Excel计划中处理的，根据学生，Manni-Whitney和Wilcoxon的标准确定了实验和控制值差异的可靠性。

健康供体的整个非稀释血液UWPE的特性

生物学对象的UWPE被认为是由于ROS参与而自由基氧化反应的电子XCCICTADES（EE）的直接结果[2]。在中性粒细胞悬浮液或高度稀释的血液制剂中，有很多研究伴随呼吸道爆发（RB）的UWPE研究。这些研究不使用未稀释的血液，因为认为血红蛋白和其他铬福雷斯应该完全淬灭UWPE。然而，我们在不存在和存在Cl放大器（Luminol，尤其是Lucigenin）的情况下观察到CL，即使处于静止状态。我们在血液后没有RB兴奋剂的情况下获得了健康供体血液的LM和LC扩增Cl的依赖性（图2）。

全血ROS产生的主要能源是主要由白细胞进行的单电子氧的反应。在那个红细胞（RBC）上，这些反应是氧气来源。填充在RBC中的血红蛋白（HB）实际上并没有从中解脱出CL。当将自由HB添加到血液中时，发光实际上消失了。因此，血液中的UWPE可能是由于该实时合作系统中的能量转移引起的次级发射而引起的（图3）。

健康供体的血液反应（图4）和梗塞患者（图5）在撤回其部分的部分以及该特性期间的财产进化中的血液（图5）表明，这表明了这一点高度非线性和合作的特性生活系统。

整个梗塞和稳定心绞痛患者的整体血液的UWPE的作用

我们研究了低水平静脉激光疗法之前和之后的稳定心绞痛患者的非稀释血液的LM依赖性光子发射（图6）。入院后，从患者入院和24小时后才取血。在当前治疗之前的3-D，7（8）和激光疗程之后。请注意，与健康的供体增加LM不同，随后是UWPE的动画增加[4]。

患者“ M.”，现年63岁，男性，有诊断后的和后期 - 心肌缺血，紧张性心理（功能性III级），动脉粥样硬化梗塞（1987）心脏衰减（1987年）心脏衰减，心脏流动性动脉炎，血流不足。第1阶段。经过8次低水平激光疗法的疗程，结合了化学疗法（硝酸盐，β-肾上腺素能拮抗剂，阿司匹林），患者感觉良好。在他入院后，添加了血液的LM诱发了PE强度的快速且非常密集的增长（图6，蓝色曲线）。轻度摇动样品随后是CL强度生长的新加速。3-D激光疗程CL的24小时降低到健康供体血液的值，尽管在样本被摇动后，CL强度开始增长。在第8次激光疗程中添加LM后，血液中的LM导致了中等的光子发射升高，但样品摇动并未导致CL的额外增加。我们对激光治疗期间心绞痛患者血液中LM依赖性CL的进一步研究表明，不仅有可能诊断患者的改善，而且还警告在发生激光治疗会议的情况下及时终止。血液CL的强度增加[4]。

慢性阻塞性肺疾病（COPD）和患者的血液UMPE

COPD的特征是没有完全可逆的气流限制（支气管阻塞），通常会稳定进展，并由肺组织对致病颗粒或气体的影响引起炎症反应[5]。COPD是与ROS产生相关的炎症性疾病。ROS具有高度的化学反应性，需要控制以防止损害[6,7]。控制系统通常称为抗氧化剂系统。在此探索中，研究了Hypoxen®[8]的作用，对ROS产生的治疗（在动力学CL中记录）在患者的血液中记录的形成（图7）。在存在LM和Zymosan（ZM）（RB的激活剂）和LC的情况下记录在血RB中，这些确定O2•生成速率。

（2）患者（2）患者和（3）通过hypoxen®和急性发作期间（1）治疗的30例COPD患者全血平均值的平均值的动力学变化（1）。Hypoxen®是一种新的有前途的抗氧化剂和抗氧化剂，在COPD患者中表现出显着的ROS保护作用，并且似乎很少发生矛盾。使用化学符号计“ Biotoks-7a”。

当前研究的目的是比较3组志愿者的整个未稀释血液中的ROS水平：接受Hypoxen®治疗前COPD患者，治疗Hypoxen®治疗后COPD患者以及患有急性攻击的患者。在Hypoxen®治疗COPD后，观察到血液中的ROS含量的统计学显着降低[8]。因此，在治疗后，在Hypoxen®任命下，在Hypoxen®任命中，在缓解阶段的COPD患者中，LM-CL的LM-CL在治疗后均降低。ROS参与的自由基氧化反应的Cl XCIC的态参数（EE）[2]。在中性粒细胞悬浮液或高度稀释的血液制剂中，有很多研究伴随呼吸道爆发（RB）的UWPE研究。这些研究不使用未稀释的血液，因为认为血红蛋白和其他铬福雷斯应该完全淬灭UWPE。然而，我们在不存在和存在Cl放大器（Luminol，尤其是Lucigenin）的情况下观察到CL，即使处于静止状态。我们获得了健康供体血液中LM和Lucigenin（LC）放大CL的依赖性，取决于血液状态。使用歧视分析，我们发现CL分类患者的动力学曲线中最重要的时间点分为组（例如，使用Hypoxen®治疗前后的COPD患者）[9]。

尽管非稀释血的不透明度高，在存在和不存在PE增强子的情况下，它可能是光子发射的强大来源。血液中PE的参数取决于其生理特性，并反映了供体的生理状态。对非稀释血液中的PE分析是一种简单而敏感的方法，可以监测患者的治疗过程。血液中的PE模式认为ROS在其中连续产生，特别是在LC存在下注册的ROS。对血液的UWPE模式的分析揭示了其高度稳定的非平衡性和合作特性，这是活体系的特征[1,3]。第一激光疗法的看似矛盾的效果 - 血液LM-CL的减少，而不是血液照射后其升高需要一些解释。首先，应强调，静脉注射后24小时进行血液分析。这意味着我们观察到了前一次的一些广义作用，而不是激光辐照血液的直接作用。然后，由于非稀释的血液高和低LM-CL的原因而出现的问题。通常认为，来自活细胞和组织的PE是由自由基氧化反应引起的激发态放松的直接结果[10-12]。 However, if this concept may be true for more or less severely perturbed systems (from simple blood dilution [13-15] to homogenates [12,16] its extrapolation to non-diluted blood, that is blood in its maximally native ex vivo state is questionable. Hypoxen® treatment of COPD patients resulted in significant alternation of LM-ZM-dependent and LC-dependent CL of whole blood of patients. This is consistent with the claimed strong antioxidant activity of Hypoxen® [9].