档案的病理和临床研究

ISSN:2640 - 2874

研究文章

组织学克隆变化——一个发育不良的诊断功能

Lewei张^{1 - 3 *},Tarinee Lubpairee^1、3丹尼斯·米Laronde^1、3、4军事,但是基^3、4富勒姆·E麦考利^3.4和米里亚姆P松香^{3 - 5}

¹口腔生物和医学科学、牙科学院、英属哥伦比亚大学的(BC),加拿大温哥华
²公元前口服活组织检查服务,温哥华总医院,加拿大温哥华
³公元前公元前口腔癌预防计划,癌症机构,加拿大温哥华
⁴公元前癌症研究中心,温哥华,加拿大
⁵生物医学学院生理学和人体运动学,西蒙弗雷泽大学、加拿大本拿比

*通信地址:Lewei张口腔生物和医学科学、牙科学院、英属哥伦比亚大学,公元前口服活组织检查服务,温哥华总医院,公元前口腔癌预防计划,公元前癌症机构,2199年Wesbrook购物中心,温哥华,加拿大,V6T 1 z3,电话:+ 1-604-875-4318 / 1-604-875-4318;电子邮件:leweizhang888@gmail.com

日期:提交:2017年9月23日;批准:2018年8月27日;发表:2018年8月28日

本文引用:张L, Lubpairee T, Laronde DM,但是M,麦考利CE。et al .组织学克隆变化——一个发育不良的诊断功能。拱中华病理学杂志2018;2:020 - 028。DOI:10.29328 / journal.apcr.1001008

版权许可:©2018张L, et al。这是一个开放存取物品在知识共享归属许可金博宝app体育下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。

关键词:发育异常的诊断;纵向研究;杂合性丢失;甲苯胺蓝

鳞状细胞癌(SCC)是最常见的人类癌症,也最常见的口腔癌。癌经常从癌变前的损伤发展和风险的预测恶性转化等病变干预至关重要的疾病。当前黄金标准组织学评估等评估风险的存在和程度的发育不良。世界卫生组织(世卫组织)和其他部门建立了广泛接受为发育异常诊断标准[1,2]。然而,仍然有争论其他特性应该包含在标准的意义。众所周知,non-dysplastic口腔病变,特别是那些hyperorthokeratosis,也可以发展为癌症。

在一篇论文吸引et al。[3],建议“角化病的病变,但没有明显的证据表明炎症,血管扩张,或纤维化”被称为“未知的意义(与)角化病”,提醒临床医生可能癌变前的这些病变的性质。在吸引的情况下,提出了论文[3],有hyperorthokeratotic大幅划定组织学病变边缘不会被大多数(如果不是全部的话)称为发育异常的病理学家根据世卫组织发育不良的标准。在我们的论文中,我们关注与子群,即hyperorthokeratotic病变没有发育不良(OKND),但与锋利的组织学界定。如果这样的病变位于腹侧舌或地板的嘴,也有人说这是舌下角化病,一个实体识别的重大恶性潜能[4]。

骂这些病变除了发育不良的问题是,医生可能不理解这些术语的重要性。在公元前口服活组织检查服务,我们通常叫OKND病变发育不良。这样做有两个原因:1)病变深染,一个功能接受发育异常的诊断;2)病变是克隆,如图所示,其锋利的组织学界定——克隆建议一个肿瘤的过程(图1)。克隆功能,然而,并没有包括在发育不良的诊断标准。通过本文的研究结果,我们希望说服病理学社区考虑加入的可能性等克隆改变发育异常的诊断标准之一。

OPLs的研究一直是我们的重点研究团队2年多来,主要对标记的发展将有助于区分进展从non-progressing轻/中度发育不良。标记包括临床视觉辅助,如结核病染色(5、6);组织学标记,如核表型得分(NPS) [7,8];和分子标记,如杂合性丢失(LOH) (9 - 12)。

结核病一直是临床上用于识别癌症和高档蔓延前的病灶染色这些病变蓝色。然而,不推荐使用轻/中度发育不良,因为高比例的这些病变是消极的结核病。这个核酸性染料染色的理论是,存在大量表面的上皮细胞层的独联体和严重发育不良,但最有可能缺席轻/中度发育不良。在2005年,我们报道,结核病阳性轻/中度发育不良癌症风险增加了4倍相比,组织学上类似结核-损伤[9]。假设,结核病正轻/中度发育异常可能增加inter-cellular染料的渗透性允许保留。

NPS是由半自动计算机图像分析的核形态。发育不良的分析不仅消除了主观评分的病理学家,还可以确定核变化发展有别于non-progressing轻/中度发育不良,太微妙,病理学家来确定和量化。在2008年,我们报道,轻/中度发育异常高的NPS分数相比,癌症风险增加了10倍,组织学上类似病变NPS分数较低[7]。

微卫星分析LOH确定损失的染色体区域包含假定的肿瘤抑制基因。最近我们发布十年跟踪数据LOH作为分子标记预测癌症恶化OPLs [9]。在这篇论文中,我们不仅验证了我们在2000年提出的发展模型[12]还细化模型。

本研究的目的是确定结核病染色,NPS得分,LOH模式和发展速度OKND病变类似轻/中度发育不良,因此提供的证据来支持这种病变的克隆功能纳入发育异常的诊断标准。

研究设计

前瞻性群组。

患者人群

参与研究的病人从先前出版的纵向研究涉及296名初级轻/中度发育不良患者[9](英属哥伦比亚大学的批准和BC癌症机构研究伦理委员会)。以人群为基础的研究涉及进行口腔癌患者前瞻性预测纵向研究在温哥华(加拿大不列颠哥伦比亚省)在1月1日,1997年和2007年12月31日。权责发生制这群来自于社会实践在不列颠哥伦比亚(2011年人口410万)。患者识别主要通过集中病理服务,BC口服活组织检查服务,收到牙医和活检ENT跨省的外科医生。这个基于活检服务每年收到250到300例发育不良病例。发育异常的病变患者称为5口腔发育不良诊所在大温哥华他们应计研究使用书面知情同意和批准的协议研究机构研究委员会。研究资格要求轻度或中度不典型增生的组织学诊断口腔癌口腔没有之前的历史。

索引的幻灯片活检的296名患者进行了综述(LZ)。的诊断标准是那些从当局和论文[1,2]。在一个简单的方式描述Warnakulasuriya et al。[2],当病变显示建筑异常和最小细胞学异型性,仅限于低三分之一的上皮,它被称为轻度上皮发育不良;当病变显示建筑异常和最小的温和的细胞学达到中间三分之一的上皮异型性,它被称为温和的上皮发育不良。正如前面提到的,我们已经叫OKND发育不良,在这项研究中,被称为不典型增生病变之前(见第二段介绍)被重新归类为OKND如果他们显示下面的组织学特点:(1)hyperorthokeratosis;(2)着色过深,但没有其他功能发育不良;(3)大幅组织学保证金从邻近区域划分hyperorthokeratosis和着色过深,和(4)没有突出网脊,明显的棘皮症或严重炎症(图1)。第四个特征不是一个诊断功能发育异常,包括排除反应病变,如hyperorthokeratotic病变牙槽脊。82年296年的病变,切口活检;因为它是不可能来判断是否有一把锋利的边缘划分,他们被排除在外,在这项研究中214例。

人口统计学、风险的习惯,并收集临床特点研究。病人每隔6个月随访,改变病变或风险习惯记录。这项研究的主要终点是时间从指数活检组织学证实发展到严重发育不良或更高的进展情况(发生在同一解剖部位指数活检)或最后跟进日期non-progressing病例。夹杂物严重发育不良的进展端点是基于我们的研究,如果不治疗,发展为原位癌和鳞状细胞癌发生在59.8%的病人[13]。

214患者中位随访时间44个月。在研究期间,25(12%)进展:10严重发育不良和15鳞状细胞癌(原位和侵入性)。

结核病染色

结核病染色包括三个步骤:首先,病变与棉花擦洗提示涂布浸泡在1%醋酸清除残骸和粘膜过剩;然后用涂布浸泡在1%的结核病和擦洗了45秒;最后,另一个用1%的醋酸,擦洗后以清水洗净即可。彩色病灶(深蓝色颜色)被称为积极的;弱或不确定污点被称为模棱两可的吸收;没有污点被称为负(图2)。

核评估表型得分(NPS)

在厚度、串行部分,4-μm削减从每个样品,放在两个玻片;一个是沾Feulgen-Thionin)和其他。选择的区域)的幻灯片病理学家(L.Z.)常规病理诊断是同一地区环绕在Feulgen-stained幻灯片与定量组织检查表型(QTP)成像系统。NPS决心如前所述[7]。

风险评估的分子模式

地区发育不良microdissected微卫星分析。相同的协议分析LOH标记染色体区域3 p14.2;4 q26 4 q31.1;8 . 3,8 p23.3;9 p21;11 q13.3 11 q22.3;13 q12.3-13 13 q14.3;17 p11.2, 17 p13.1应用在这个前瞻性研究如前所述[12]。

统计分析

分类数据之间的关联与卡方测试而未配对t检验用于连续数据。kaplan meier Time-to-progression曲线估计的方法,并使用生存率较进行比较。风险比率(小时)和相应的95%置信区间(95% CI)使用Cox回归分析确定。P≤0.05被认为是显著的。

人口和习惯信息如表1所示。轻/中度发育不良的诊断或OKND并不与年龄相关的诊断、性别、种族或风险的习惯。

我们下比较两组之间的临床病变特征(表2)。许多指数病变被牙医检查前患者参加我们的纵向研究从组织学诊断口腔发育不良或OKND是入学要求。因此我们没有对所有索引病变临床图片。然而,许多OKND尖锐指出界定了至少在临床的一部分利润,一个功能也被观察到一些发育异常的病变。由于缺乏一套完整的图片,本研究没有调查组织是否急剧界定OKNDs也表现为临床尖锐的界定。

比例明显高于发育异常的病变组位于一个高风险网站(腹外侧舌头和口腔的地板),而从OKND病变组。网站详细看时,一个更高比例的OKND损伤被发现位于齿龈,前庭和脸颊区域(OKND 65% vs 28%轻/中度发育不良,P = 0.002),常见的网站疣状病变(疣状增生或癌)。我们质疑一些OKND疣状病变在持平黏膜白斑病的阶段。我们看的关系发育不良和OKND疣状病变(后来发展成一个疣状病变或是否有疣状病变在其他口服网站)。比例明显高于OKND与疣状病变与发育不良(50% OKND vs 8%发育不良,P < 0.0001),表明OKND和疣状病变之间的关系。

两组之间的结核病状态相似。组织学检查轻/中度发育不良的比例高的NPS得分的两倍是OKND组(30% vs 15%),虽然并没有显著的差异。

我们下一个比较了两组分子风险模式(表2)。LOH,我们看着两个分子的风险模型。使用第一个模型,一个更高比例的损失指出了OKND组与轻度或中度发育不良组9点p, p和3 p和/或9 p。在3 P的区别显著(P = 0.049)和3 P & /或9 P几乎显著(P = 0.052)。再次使用第二个模型中,一个更高比例的中间——高危病变在OKND组而发育不良组,虽然并没有显著的差异。

最后,我们比较了两组病变进展的概率。无显著差异,结果发现在两组之间(表2)。kaplan meier情节进展的组织学诊断显示非常相似的情节的两组病变(图3)。

口腔白色病变是常见的。这些病变组织学检查显示角化过度(hyperparakeratosis或hyperorthokeratosis或两者)和/或上皮棘皮症有或没有发育不良。当前黄金标准判断恶性潜能组织学评估这些病变的存在和程度的发育不良。不幸的是一些non-dysplastic病变癌变前的,尤其是那些hyperorthokeratosis。

支持证据hyperorthokeratotic口腔病变的恶化前的潜力主要来自临床医生在坊间经验或案例研究的形式。术语舌下角化病[4]提出了几十年前指定这些病变的地板上嘴和腹外侧的舌头。与库的子群,吴等人提出的一个术语。[3],指定类似病变但不限于口的舌下或地板。不幸的是这些术语并不非常有用的指导临床管理的病变,因为大多数临床医生正在寻找“发育不良”这个词来表示这些病变的恶化前的性质和缺乏这样的话意味着没有风险。

orthokeratotic病变的恶化前的性质已经被别人。“orthokeratotic发育不良(OKD)发表的一项研究由小林et al。[14],描述hyperorthokeratotic病变与颗粒细胞层(没有提及是否发育不良的)。这项研究调查了200例口腔鳞状细胞癌,31%(62/200)的显示OKD疫源地。绝大多数(80%)毗邻癌症和一些(20%)是分开的。三种OKD显微照片显示:两个发育不良的,一个不是。在后续研究中,Aida et al。[15],用这个词来描述hyperorthokeratotic病变没有发育不良,即使轻度异型性。因此这些病变OKND类似病例。他们调查了20例OKD和证实了他们的癌变前的自然发现他们经常与口腔鳞状细胞癌(9/20,45%),染色体不稳定和缩短端粒长度。

如表3所示,从其他反应病变OKND病变的鉴别诊断并不困难。反应性角化病的病变主要是与一些例外比如parakeratotic牙槽脊,很少有其他网站。此外,反应性损伤非常经常伴随着棘细胞层的增厚,棘皮症的形式和/或扩散长网脊,经常广场或尖的形状。反应性损伤也更容易发炎而OKND病变通常显示没有沉重的炎症。

在本研究中我们提出一个克隆模式的变化应包括作为发育异常的诊断标准。克隆扩张是肿瘤过程的基本特征之一。一些发育不良,疣状增生和鳞状细胞癌显示这种克隆的变化,即。从相邻的正常粘膜、犀利的界定。因此克隆变化的包容作为发育异常的诊断标准是有意义的。

本研究将OKND与轻/中度发育不良使用多个癌症风险标记(临床结核病;组织学,NPS;分子,LOH)和随访数据。

临床上,我们发现这两组之间没有明显的差异在结核病的地位。令人惊讶的是,有差异的两组病变的位置。比例显著降低OKND指出在高风险网站相比,轻/中度发育不良(30% vs 61%;P = 0.009)。由于舌下角化病是OKND的一部分,我们曾以为,一个更高比例的OKND将位于高风险网站。相比之下,一个更高比例的OKND位于齿龈,前庭,脸颊区域——共同为疣状病变。我们还发现OKND更可能有后来成为疣状病变或其他口腔网站疣状病变。这些发现表明,至少有一部分OKND可能是疣状病变的先兆。这一事实OKND显示类似的癌症风险尽管位置低风险的网站支持癌变前的这些病变的性质。

毫不奇怪轻/中度发育不良组显示病例数量的两倍高NPS分数OKND组相比,考虑到OKND缺乏核发育异常的特点。OKND之间最重要的是,发展率和轻度或中度发育异常相似,表明OKND病变轻/中度发育不良也有类似的恶性潜能。我们呼吁研究团体学习等病变,比较这些病变的恶性潜能和发育异常的病变,尤其是在多中心研究。如果进一步的研究证实了我们的结论,我们应该考虑包含克隆变化急剧界定是发育不良的诊断标准之一。目前这样的包容将指定病变不叫发育异常的发育异常的,可以提供更好的指导临床医生提高这些病变的临床管理。

作者要感谢江Huijun博士为她协助数据收集和统计分析。这项工作是R01 DE13124赠款支持和R01 DE17013国立牙科和颅面研究。

作者的贡献

l .张导致概念、设计和数据分析、起草文稿;t . Lubpairee D.-M。Laronde, m .但是已经雕刻。麦考利,M.-P。松香导致概念、设计和数据分析和批判性的修订手稿。所有作者最终批准和同意负责所有方面的工作。