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的oai: heighpubs.org: 10.29328 / journal.abb.1001022 2021-03-12 HJB: VOL5

序列独立单引物扩增(SISPA)技术用于检测细胞培养中意外RNA病毒不定剂 Davood Bahador 阿什拉夫穆罕默 Abolhasan这位设计师 Behnam Alirezaie & lt; p> Abstract< / p>序列独立，单引物扩增(SISPA)使核酸的随机扩增，允许对不同的病毒制剂进行检测和基因组测序。SISPA法的这一特点为其在细胞培养中监测外源RNA病毒的存在提供了依据。我们评估了SISPA方法用于检测细胞培养中代表不定因子的挑战RNA病毒。此外，通过优化本实验室的SISPA方法，我们在电泳凝胶中发现了阴性对照道的假阳性结果。为查明污染来源，将ssispa假阳性结果克隆到大肠杆菌细胞中，进行测序和系统发育分析。这些数据表明，SISPA方法可以作为一种辅助方法来确定细胞培养中没有意外的不定RNA病毒。对SISPA污染序列的系统发育分析表明，假阳性结果是由商业cDNA合成试剂盒试剂核酸扩增引起的，可能追溯到表达质粒和宿主核糖体序列，用于酶的生产。因此，使用随机放大方法的实验室必须不断意识到这种污染的可能性，在最终的NGS读取中产生假阳性结果和背景噪声。< 生物技术和生物医学档案-提高科学出版公司188bet体育 2021-03-12 研究文章 //m.lakotalakes.com/hjb/abb-aid1022.php 在 版权所有©Davood Bahador等人。