免疫组织化学表达巢蛋白在神经胶质瘤肿瘤干细胞标记

背景:神经胶质瘤是最常见的原发性肿瘤的中枢神经系统(CNS),导致一半以上的脑部肿瘤的发病率。癌症干细胞标记(CSC)识别高危组患者进展。巢蛋白中间丝(如果)蛋白是第一次描述了作为神经干细胞/祖细胞标记。Nestin-positive subventricular区的神经上皮干细胞是发现成人的大脑和他们仍然mitotically活跃在成年。巢蛋白的表达在神经胶质瘤相关建议去分化,提高细胞活性,入侵潜力,增加恶性肿瘤。本研究旨在探讨巢蛋白免疫组织化学表达在不同类型的神经胶质瘤和与不同的临床病理参数的相关性。

材料与方法:巢蛋白免疫染色,研究了在60神经胶质瘤标本使用avidin-biotin过氧化物酶的方法。

结果:巢蛋白强烈表达了在11/60(18.33%),中度表达29/60(48.33%)和每周用15/60(25%)的研究神经胶质瘤。之间显著正相关关系被发现巢蛋白表达与组织学类型(p< 0.001),增加神经胶质瘤(等级p< 0.001)。

结论:增加巢蛋白表达与肿瘤进展,提高品位和可怜的神经胶质瘤的预后参数。巢蛋白是一个有用的标记检测CSC中高档神经胶质瘤负责chemo-radiotherapy阻力,可能作为预测病人的结果。

神经胶质瘤是最常见的脑肿瘤,造成超过一半的脑部肿瘤的发生率[1]。他们组成一个异构群neuroectodermal肿瘤源自可能引起星形细胞瘤的神经胶质细胞,少突神经胶质瘤和瘤,分别。

近年来,进步的理解低级神经胶质瘤(LGG)生物驱动的分子标记的新范式,诊断成像,手术技巧和技术,和辅助疗法。总的来说,这些发展是共同推动信封向提高生活质量和生存[2]。神经胶质瘤负责每年在美国大约有13000癌症相关死亡[3]。在埃及,中枢神经系统肿瘤占-2%的所有人类肿瘤1%优质神经胶质瘤是最常见的类型[4]。神经胶质瘤的发展通过大脑去分化的成熟细胞构成。然而,一系列研究已报道的密切参与癌症干细胞(二者)机制发展的神经胶质瘤[5]。

寻找在神经胶质瘤预后和预测生物标志物是一个面积相当大的兴趣,因为病人对治疗的反应不同,有不同的预后[6]。一些研究人员认为,肿瘤生物学和抵抗治疗紧密连接二者的存在[7]。二者的重要性估计神经胶质瘤患者的预后因此被广泛调查使用了标记这些细胞的存在密切相关[8]。二者负责阻力件多样的放疗和化疗(GBM),从而导致穷人生存病人[9]。二者的重要性评估神经胶质瘤患者的预后因此被广泛调查使用了标记这些细胞的存在密切相关[10]。巢蛋白是一个类VI中间丝状体(如果)蛋白质,第一次被描述为神经干细胞/祖细胞标记[11]。神经上皮干细胞能够分化成神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞,巢蛋白已被证明是理气完全消失在这种分化[12]。调查巢蛋白作为二者的细胞表面标记表明,脑部恶性肿瘤的诊断和治疗的效率可以改善通过确定这些细胞表面标记[13]。

组织样本

Formalin-fixed,石蜡包埋的大脑肿瘤组织块从六十患者选择前瞻性的标本送到从精神外科病理学实验室,医学院,索哈杰省大学从2016年1月至2018年7月期间。研究伦理委员会的批准。神经胶质瘤分级按照世卫组织,2016评分系统,基于特定的组织病理学特征如细胞结构,核异型性,有丝分裂活动、微血管增生和坏死。

免疫组织化学

后评估苏木精和伊红染色幻灯片,串行部分从每一块被用于免疫组织化学(包含IHC)巢蛋白用抗生物素蛋白生物素过氧化物酶复合物的方法。1:15 0稀释的鼠单克隆抗体对人类巢蛋白(克隆10 c2,猫。使用# GTX30671,基因特克斯)。

得分的免疫反应和统计分析

巢蛋白表达出现褐色细胞质染色。免疫反应性的分数(IRS)是由乘法估计百分比的免疫反应性的细胞(比例分数;PS)估计的染色强度(强度得分;)根据Arai, et al . [14]。

分数被定义为积极的百分比比例染色细胞:0 = -,< 30%的肿瘤细胞阳性(+),30% - -60%阳性肿瘤细胞(+ +),> 60%的肿瘤细胞阳性(+ + +)。一个强度得分被定义为积极的肿瘤细胞的染色强度:没有染色= 0,弱染色= 1,介质染色= 2,强烈的染色= 3。1 - 3被认为是弱的国税局,4和6是温和的,9被认为是强大的。

统计分析

数据分析使用SPSS程序17.0版。定量数据被表示为±标准差,值和范围。定性数据被表示为数量和百分比。正常使用Shapiro-Wilk测试的数据进行了测试。非参数Mann-Whitney测试,克鲁斯卡尔-沃利斯检验和斯皮尔曼的相关性是用于数据不是正态分布。p0.001 > 0.05被认为是显著和>被认为是非常重要的。

研究患者的年龄范围宽1.5 - 72年,与平均数±标准差为38.23±22.41岁,平均年龄是44年。男女比例为1.14:1。代表)的彩色部分收集60神经胶质瘤标本进行评估根据世界卫生组织的分类[15],为以下组织学类型:

pilocytic 7 7/60(11.7%)例星形细胞瘤,21个21/60(35%)例弥漫性星形细胞瘤,5 5/60(8.3%)例室管膜瘤,5 5/60(8.33%)例少突神经胶质瘤,9 9/60(15%)例未分化星形细胞瘤,两个2/60(3.33%)例未分化室管膜瘤,11(18.33%)例胶质母细胞瘤各种形式的11/60。神经胶质瘤分级是根据世界卫生组织的分级系统[15]根据组织学发现分为四个等级

7例(7/60;我11.7%)年级;较低的细胞结构和有丝分裂或坏死。31例(31/60;51.67%)二级;与温和的多孔性、多形性和核异型性。11例(11/60;18.33%)三级;具有高的多孔性,核异型性和轻快的有丝分裂活动。11例(11/60; 18.33%) grade IV; featuring high cellularity, pleomorphism, brisk mitosis, microvascular proliferation and geographic necrosis. Nestin expression appeared as brownish cytoplasmic staining. Nestin expression varied among different types and grades of gliomas (Table 1). Nestin was expressed in 55/60 (91.7%) of studied glioma; being weakly expressed in 15/60 (25%), moderately expressed in 29/60 (48.33%) and strongly expressed in 11/60 (18.33%) of the studied cases. There was significant correlation between Nestin expression and both histological type (p< 0.001),肿瘤年级(p< 0.001)(图1、2)。然而,之间没有统计相关性巢蛋白表达与年龄、性别的患者,肿瘤大小或肿瘤部位(图1)。

我们的研究包括60神经胶质瘤标本追究巢蛋白表达。美国国税局的巢蛋白研究与临床病理的变量(年龄、性别、肿瘤部位、大小、肿瘤组织学类型和年级)。本研究发现,巢蛋白表达的55/60(91.7%)的神经胶质瘤。这个表达式的11/60 (18.33%);8/60(13.33%)的胶质母细胞瘤多样的,3/60(5%)的间变性星形细胞瘤。巢蛋白适度表达29/60(48.33%)的研究神经胶质瘤;15/60(25%)的弥漫性星形细胞瘤,2/60(3.33%)室管膜瘤,6/60(10%)的间变性星形细胞瘤,2/60(3.33%)未分化室管膜瘤,3/60(5%)的胶质母细胞瘤各种形式和1/60 (1.7%)pilocytic星形细胞瘤。最后,周巢蛋白表达在15/60(25%)的研究发现神经胶质瘤;3/60(5%)的少突神经胶质瘤,3/60(5%)室管膜瘤,4/60 (6.7%)pilocytic星形细胞瘤和5/60(8.33%)弥漫性星形细胞瘤。巢蛋白强烈表达研究神经胶质瘤的11/60(3/11三级和8/11谁等级IV)和适度表达29/60(1/29谁年级我,17/29二级,三级和8/29 3/29人等级IV)。周巢蛋白表达注意到在15/60例(4/15二年级我和11/15年级)。我们的结果显示一个显著地相关性巢蛋白表达与组织学类型(p< 0.001)和神经胶质瘤病理评分(p< 0.001)。这些结果与以前报道的协议Strojnik, et al。[16]谁在他们的研究中发现,巢蛋白表达于87年95.8%的患者在高收入比明显高于低度恶性肿瘤(p<。)。它被证明是一个强有力的预后标记(整体存活率降低p=。)[16]。

妈,等。[17]证实,巢蛋白是谁与肿瘤的肿瘤72例,们,等。[18]发现,胶质母细胞瘤/ 65不同的脑部肿瘤33例为巢蛋白阳性,广域网,等。[19]组织微阵列用于283例脑瘤和得出结论,巢蛋白表达与肿瘤相关年级,Arai,等。[14]研究了257例脑瘤,巢蛋白与糟糕的整体存活率[19]以及Hatanpaa et al。[20],在50例,和林,et al。[21]在41例。相比之下;王妃,先前的研究等。[22]表明,巢蛋白表达在低收入和高级别胶质瘤和没有与肿瘤16例脑瘤的品位。我们建议他们的结果可能是由于应用兔多克隆反巢蛋白在他们的研究与单克隆抗体用于我们的是更具体的[22]。然而,矛盾的研究,Chinnaiyan,等。[23]评估巢蛋白156例胶质母细胞瘤组织微阵列的各种形式的,他们没有发现统计上的显著差异在总体存活率或无进展生存(PFS)[23]和金姆,等。[24]的结论是,巢蛋白不是88例胶质母细胞瘤的预后因素多样的使用免疫组织化学技术。

增加巢蛋白表达与肿瘤进展,提高品位,和神经胶质瘤的预后不良。巢蛋白是一个有用的标记检测CSC中高档神经胶质瘤,可能作为预测病人的结果。

研究巢蛋白的表达在很多情况下,不同种类的神经胶质瘤手术切除的利润率。前瞻性研究应进行正确驱动的基于这项研究,确定这些发现的意义;跟进的病人和足够的信息对治疗的反应强调巢蛋白表达与患者之间的关系总体存活率和疾病的结果。研究巢蛋白的表达变化与其他CSC相关标记(e。g CD133)澄清其在神经胶质瘤肿瘤发生中的作用。

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