一个Apheretic过程对内皮功能的影响评估外周动脉张力测定法和内皮祖细胞

Gabriele Cioni^{1 *},弗兰西斯卡塞萨里¹,Rossella Marcucci¹安娜玛丽亚戈里¹,卢西亚Mannini¹,Agatina Alessandrello李欧塔¹,艾琳娜Sticchi¹,Ilaria Romagnuolo¹,罗赞娜Abbate¹,乔凡娜D 'Alessandri²

¹实验和临床医学系,佛罗伦萨大学AOU Careggi,意大利
²SIMT USL 3,皮斯托亚

*通信地址:Gabriele Cioni,医学博士。实验和临床医学系,佛罗伦萨大学Brambilla庄严的3 50132年,佛罗伦萨,意大利,电话:331 1357 167;电子邮件:gabriele.cioni@unifi.it

日期:提交:2016年12月17日;批准:2017年2月17日;发表:2017年2月22日

本文引用:塞萨里Cioni G F, Marcucci R,戈里,Mannini L,等。一个Apheretic过程对内皮功能的影响评估外周动脉张力测定法和内皮祖细胞。拱血管医学。2017;1:001 - 007。DOI:10.29328 / journal.hjvsm.1001001

版权许可:©2017 Cioni G, et al。这是一个开放存取物品在知识金博宝app体育共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布,在任何介质,和繁殖提供了最初的工作是正确引用。

缩写:CPEC:循环内皮祖细胞;EPC:内皮祖细胞;密度:低密度脂蛋白胆固醇;Lp (a):脂蛋白(a);Ln-RHI:自然对数反应性充血指数;帕特:外周动脉张力测定法;奥镁:反应性充血指数

胆固醇在动脉内中膜的积累相关的内皮功能障碍和炎性负担,构成动脉粥样硬化进展[1]的第一步。降脂治疗是预防心血管疾病的基石,而且,在选定的高风险患者,lipoprotein-apheresis可以添加到标准疗法优化二级预防(2、3),改善预后。

的急性和慢性影响lipoprotein-apheresis广泛调查在最近的一次审查[4]。关于急性效应,先前的研究表明,单个apheretic过程积极影响血管内皮功能,评估两臂[5]的血管舒张和心外膜冠状动脉[6];然而,作者调查程序后只有24小时的效果。apheretic疗法的长期改善血脂[7],和稳定的动脉粥样硬化病变,特别是通过减少循环pro-thrombotic因素[7]。

因此与最近的两项研究(8、9),内皮祖细胞参与血管修复和增殖,导致apheretic治疗的长期有利影响。减少促炎和pro-coagulant效果,除了直接减少血浆低密度脂蛋白水平,可能导致血管的保护。本研究的目的是探讨内皮功能之间的关系,评估水平的骨骨髓来源祖细胞和内皮充血反应和临床和biohumoral参数,在高血管危险病人之前,之后,24小时和72小时后一个脂质apheresis过程。

研究人群

研究人群包括8个病人(M性:62.5%;年龄;63.29(12),意思是,(范围)年)与急性冠脉综合征的个人历史,外周动脉疾病症状和等离子体的Lp (a)水平升高,发生慢性apheretic治疗超过一年(两年(1 - 4))(根据当前美国社会Apheresis (ASFA)指导方针)[10]。稳定的CAD是由冠状动脉摄影记录。入选标准包括:1)脂蛋白(a)等离子体水平> 600 mg / L;2)CAD记录由冠状动脉造影;3)低密度脂蛋白水平目标预期内高危干预患者,根据ESC指南;4)低或没有响应最大hypolipemic药物治疗。排除标准包括:1)自身免疫性疾病;2)癌症或癌症历史; 3) acute or chronic disease affecting liver or kidney function; 4) acute illness at the visit time.

研究协议

我们之前评估血脂和血管内皮功能(T0)后立即(T1), 24小时后(T2)和72 h (T3)脂蛋白apheresis之后。所有受试者评估在一个安静的房间,早上从血液采样。随后,医疗进行了问卷调查和体格检查。舒服的休息至少15分钟后在仰卧位,一个操作员进行血液取样和外周动脉张力测定法;随后,病人接受了脂蛋白apheresis。手术后,病人的血液样本和内皮功能评估由帕特。先后,评价血脂和帕特脂蛋白apheresis后评估进行了三天。

知情同意

知情同意是获得所有的病人,根据《赫尔辛基宣言》。

临床评估

临床评价包括:医疗问卷;体检,为了收集变量如心率、血压值、身高、体重、身体质量指数(BMI)、腰围;12导心电图在休息的时候。心血管风险因素的存在(crf)是评估在每一个主题,根据目前的指南:高血压(收缩压> 140毫米汞柱,舒张压> 90毫米汞柱,根据欧洲高血压学会的指导方针/欧洲心脏病协会,或服用抗高血压治疗);dyslipidaemia(根据国家胆固醇教育计划的第三份报告(NCEP-III)和2012年东亚峰会,或服用降脂药物);糖尿病(口服治疗那些代理,胰岛素,或者两者兼有,或空腹血糖水平> 126 mg / dl,同意美国糖尿病协会);家族史的CAD(第一或第二度亲戚过早心血管疾病);和吸烟习惯。我们认为传统心血管危险因素:dyslipidaemia或低密度脂蛋白≥70 mg / dl;高血压或血压≥140,舒张压≥90,非糖尿病,SBP和120年和80年类似糖尿病患者; BMI≥25; diabetes; smoke habits.

脂蛋白apheresis过程

患者定期每周或每两周脂蛋白apheresis治疗肝素诱发与fda体外低密度脂蛋白降水(H.E.L.P.) (Plasmat未来,B。德国布劳恩,Melsungen)技术[10]。肝素抗凝是由一个初始丸(20 IU肝素/公斤体重),其次是肝素持续输注。肘前的静脉血液担任访问。意味着等离子体体积对待每次大约是3或4 L,据美国社会Apheresis (ASFA)指南[10]。

通过外周动脉张力测定法反应性充血

内皮功能是由外周动脉张力测定法测量(PAT);帕特值表示为反应性充血索引值的自然对数(ln-RHI),根据前面描述的过程[11]。拍信号获得使用EndoPAT 2000设备(Itamar医疗有限公司该撒利亚、以色列),一种非侵入性技术提供beat-to-beat plethysmographic记录手指动脉脉搏波振幅的数字气动探针,很大程度上验证并用来评估心血管风险(12 - 15)。一个广泛的描述这种方法和其他地方提供的分析算法[16]。根据文献[17],Ln-RHI > 0.4被认为是切断正常价值。我们在T0帕特执行评估,T1、T2和T3。

血液采样

在T0静脉血样采集单apheretic过程之前,早上,通宵禁食后;收集血液样本T1后立即apheretic procedureT1。静脉血液样本收集T2和T3 24 h (T2)和72 h (T3)手续后,分别后的早晨,通宵禁食。从肘前的静脉静脉血液样本收集到疏散塑料管(真空采血管)。

流仪结果

内皮祖细胞(EPC)和循环内皮细胞(CEC)的评估是评估通过流式细胞术如前所述方法[18]。循环内皮祖细胞被确定通过CD34的表达,KDR, CD133和被视为EPC细胞CD34 + / KDR +, CD133 + / KDR +和CD34 / CD133 + / KDR +。个cec上被定义为散射和较低的细胞形成一个集群low-to-intermediate CD45染色和CD34 +阳性,CD133 +和CD34 + / CD133 +。的intra-assay EPC测量的变异系数为7.8%。intra-observer和inter-observer变化的方法显示了内部类相关系数为0.97和0.92,分别。

我们在T0执行EPC和CEC评估,T1和T2。

生化参数

纤维蛋白原测定凝血试验和高灵敏度C反应蛋白(hs-CRP)由高灵敏度浊度的测定(戴德Behring GmbH,马尔堡,德国)。Lp (a)是衡量一个immune-nephelometric方法(LPAX“贝克曼库尔特);≥500 mg / L值被认为是异常。血脂分析和完整的血细胞计数标准方法进行。

统计分析

数据库建设和统计分析进行SPSS(社会科学统计软件包,芝加哥,美国)为Windows版本(19)。分类变量表示为频率和百分比;分析数据分布是评价通过卡方检验(统计学意义,p < 0.05)。连续变量表示为平均数±标准差。

连续变量比较用方差分析测试。非参数Mann-Whitney和Kruskall-Wallis测试用于未配对的分析数据。相关分析是衡量使用枪兵的相关测试。被认为具有统计显著性p值< 0.05。

sStudy人口的特点

研究人群的特点是表1中列出。

在研究小组没有发现吸烟者。所有受试者服用抗高血压药的一个或多个与压力控制。只有一个科目是糖尿病,最佳的血糖控制(Hb1Ac = 5.2%,空腹血糖= 0,95 g / L)。一个主题是不能容忍他汀类药物。

病人没有任何不利影响脂蛋白apheresis相关;程序进行根据指导方针建议(参见表2生化参数的预处理和post -过程)。肝脏和肾脏功能的标志出现在不同样本在正常范围内。

在脂蛋白apheresis生化参数

生化参数在不同的时间被描述在表2。

在基线,所有患者显示低密度> 70 mg / dl,在分歧与当前的指导方针。正如所料,低密度脂蛋白、甘油三酯和Lp (a)值明显降低手术后。在T1,我们发现了一个显著减少低密度(74%)、甘油三酸酯(35%)和Lp (a)(88%)值;减少坚持T2,显示一个值为29%,84%,41%的基线,分别(表2)。减少脂质标记在所有患者记录。关于炎症标记物,纤维蛋白原和hs-CRP值下降在T1, T2和T3相比基线。

外周动脉张力测定法和流量仪分析

外周动脉张力测定法值之前脂蛋白apheresis在所有病人在正常范围内。

Ln-RHI人口低于价值的价值观研究发现在一级预防,在先前发表的数据报道(18、19)。

后我们发现减少Ln-RHI过程(表2);T2和T0之间的差异在统计学上意义重大。减少apheresis后Ln-RHI值被记录在所有的病人;特别是,两个主题显示Ln-RHI < 0.4在T1,和四个主题显示T2异常值。

在T3,帕特值显著增加T1和T2相比,与T0的价值高于中值。

关于EPC数量,我们会增加进步T2与基线相比。详细、Cd34 + / Kdr +和Cd133 + / Kdr +显示最小值中值增加在T1, T2高增加,相比基线。Cd34 + / 133 + / Kdr +差异值在不同的时间未达到统计上的显著水平。显著减少CEC数T2 T0相比。

之间的显著相关性Cd34 + / Kdr +和Cd133 + / Kdr +计数(r = 0.98, p < 0.0001),和Cd34 + / Cd133 + / Kdr +计数(r = 0.82, p < 0.0001)被发现;同样,Cd133 + / Kdr +和Cd34 + / Cd133 + / Kdr +数显著相关(r = 0.97, p < 0.0001)。

我们检查了一个二级预防人口高Lp (a)水平,进行慢性脂蛋白apheresis治疗至少1年,根据ASFA指南。所有的受试者都接受相同的程序,而不是在研究期间实验不利影响。在这项研究中,我们观察到每一个过程有关的显著改善血脂,而且,在24 h和72 h过程后,我们发现改善内皮功能的增加表达的帕特的价值观和EPC的水平,和CEC的减少。稀缺的证据记录apheresis微血管功能的急性效应,作为评估帕特;特别是,陆等。[20]报道缺乏在手术后急性apheretic改善内皮功能,确认我们的数据。此外,Patschan et al。[8]报道,没有显示增加总epc hyperlipidemic apheresis后立即治疗的病人。

最近的证据表明,全球改善内皮功能的过程记录在20小时后治疗。特别是Ramunni et al。[9]显示内皮祖细胞水平的增加脂蛋白apheresis 24小时后,表明这种变化是相对于休眠的动员池。Mellwig et al .(研讨会)记录的改善内皮功能在20小时后程序纯合子和therapy-resistant高胆固醇血症患者治疗技术的帮助。

几种机制负责有益的多效性的脂蛋白apheresis对内皮功能的影响可能包括血脂的优化,减少氧化应激,血管压力和流变学,分享的好处和改善炎症内稳态微macrovascular区(4,21);特别是,这些不同的路径最终影响各种祖细胞数量的计数。此外,药物疗法正在进行的时候学习积极调节内皮功能。这些变量的总和可以解释看似不错的内皮功能基线,尽管高心血管风险。

增加的百分比之间的正相关关系发现Ln-RHI和Lp (a)值可以表达更有利的结果患者更高的基底Lp (a)值;的过程可能导致全球改善血管功能减少Lp (a)患者长期更容易受到伤害。这个累积正对内皮功能的影响可能是钢筋在每个脂蛋白apheresis,赋予血管功能的保护作用。此外,我们发现了一个显著减少纤维蛋白原和hs-CRP水平,证明炎症系统上积极的情感。在我们所知,这是第一个工作评估工具和内皮功能的细胞标记,并显示72 h脂蛋白apheresis的影响。