摘要目的:这项研究的目的是评估如果有唾液胃蛋白酶水平之间的联系和牙齿侵蚀。同时,以确定胃食管反流病(GERD)是负责大部分的牙齿侵蚀被牙医。

背景:胃蛋白酶只是胃内产生。如果发现在身体的其他部位(例如在唾液或痰液样本),唯一可能的机制是通过胃内容物返流。牙酸蚀病的原因之一,被认为是由于齿面之间的直接接触和酸性物质和消化酶在胃refluxate。胃食管反流病是一种常见的情况,其患病率似乎趋势在最近几十年高。据报道,这是一个已知的导致牙齿侵蚀。假设,有一个期望看到患者牙科侵蚀有胃蛋白酶检测(也许在高的水平),看到病人没有牙齿侵蚀没有或低水平的胃蛋白酶。

方法:三个收集唾液样本(在清醒和2餐后)从50匿名参与患者(26岁女性,24岁男性)从一个牙科实践。额外的信息收集与生活方式有关,返流症状指数(RSI -回流问卷)和牙齿侵蚀。这些样本分析胃酶使用验证医疗设备Peptest胃蛋白酶。

结果:没有积极的胃蛋白酶水平之间的相关性和牙齿侵蚀的存在在这个研究。有统计差异醒来酸度与积极的胃蛋白酶水平和膳食后与积极的胃蛋白酶的水平。醒来的平均pH值较低且饭后样本与积极的胃蛋白酶,这表明唾液酸和胃反流发生。相反,醒来的平均pH值较高且饭后和样品-胃蛋白酶。没有统计学差别pH值与牙齿侵蚀和膳食后醒来。

结论:病人认定有牙齿侵蚀没有更高层次的胃蛋白酶检测,表明胃蛋白酶没有与这些患者的牙酸蚀病。

牙酸蚀病是由于持续的齿面之间的直接接触和酸性物质,这是一种常见的情况,其患病率似乎趋势高近几十年来[1]。牙酸蚀病被定义为牙齿结构的不可逆损失由于化学溶解通过酸性物质。

牙酸蚀病是一种多因素疾病。考虑的化学、生物和行为因素是基本的预防和治疗。生物因素中,唾液是最重要的参数之一,防止腐蚀的伤害[2]。

胃蛋白酶是一种酶,发现在18世纪,第一个发现酶以及第二个酶结晶[3]。具体来说,蛋白水解酶发现胃蛋白酶主要在胃内,最初表现为胃蛋白酶原前体物质,称为发酵菌,胃粘膜细胞内发现。主细胞在胃分泌胃蛋白酶原然后激活通过盐酸(HCI)通过在胃粘膜壁细胞(分泌),胃液中的人机交互不活跃的胃蛋白酶原形式转换成酶胃蛋白酶的活性形式(图1)。胃蛋白酶能够降低食物和蛋白质多肽,最终产生消化。消化蛋白酶,胃蛋白酶消化过程中在三个物质援助不过胃蛋白酶的主要组件中所有胃液消化过程无法完成没有它存在。

如果胃蛋白酶在唾液中发现它表明它已经回流到喉咙口/指示返流性疾病,因此会导致牙酸蚀病。胃酸已经证明取代唾液从齿面(2、4)。增加发病率和患病率高侵蚀牙与牙敏感观察到在许多国家在世界范围内,在儿童和成人[5]。在目前的试点研究,我们将看到患者牙齿侵蚀胃蛋白酶和病人发现没有牙齿侵蚀没有或低水平的胃蛋白酶。

招聘

50个病人参加格雷厄姆·波特牙科(英国Cottingham)被邀请参与当前的研究。东米德兰兹-诺丁汉1研究伦理委员会批准了这项研究(REC参考16 / EM / 0409)。所有研究中患者被要求提供三个如果唾液样本吐到收集管提供1毫升唾液样本,一醒来的时候在吃之前和清洁牙齿和两餐后60分钟吃午餐和晚餐后提供样品。所有样品都是匿名前胃蛋白酶RD生物医学有限公司中心实验室进行分析在城堡山医院,Cottingham。RD生物医学有限公司收到任何身份信息链接研究患者的样本。这是实现通过病人招聘牙科实践中发生。牙科实践给出了员工培训对胃蛋白酶/ Peptest如果病人有任何问题没有得到解决,在患者信息表。

RD生物医学有限牙科实践提供了一个excel电子表格,其中包含代码的列表,每个代码代表病人的一项研究。牙科实践代码分配给每个病人,注意旁边的病人名字分配代码,是否有牙齿侵蚀。电子表格是密码保护,没有访问给RD生物医学有限。

研究患者接受同意书上签字。患者提供唾液收集管和指令在牙科实践和要求生产唾液样本在家里和返回的样品(使用提供的free-post信封)实验室进行分析。所有患者完成了回流问卷(反流症状指数,RSI)[6]建立如果他们有反流症状。为胃蛋白酶使用Peptest唾液样本进行分析。

在每个访问病人参加牙科实践经常检查牙齿侵蚀和审查在每个后续访问。在当前的研究中为每个病人招募到研究牙医是要求记录如果牙酸蚀病存在或不存在。

胃蛋白酶的分析

三个集合管含有唾液样本在4000转离心5分钟,直到清楚上层清液层是可见的。80年从表层µL起草使用一个自动吸管。80年µL样本被转移到一个包含240µL超小型电子管迁移缓冲区。320年µL混合物是涡10秒钟。用吸管80µL混合物转移到圆形的侧流设备(最晚完成日期)包含两个独特的人类单克隆抗体;一个检测和一个捕获任何临床样本中出现的胃蛋白酶(Peptest、RD生物医学有限公司、英国)(图2),一个“控制”窗口内的线是最晚完成日期,如果测试成功生成和测试线如果样品含有胃蛋白酶。最晚完成日期被转移到一个立方体Peptest读者测量测试线的强度,给胃蛋白酶的浓度在ng / mL的唾液样本。

统计分析

未配对t检验进行尽可能使用统计软件包GraphPad棱镜8.4.0 (GraphPad软件,圣地亚哥,92018年,美国)。p值< 0.05被认为是具有统计学意义。

共有50个患者参加一个牙科实践被招募的,他们的人口统计信息匿名进入研究之前。性别分裂26岁女性和24男性平均年龄60岁和25岁至85岁年龄段。这是一个年龄范围广但即使病人年龄范围的高端毫无困难地提供一毫升唾液样本。每个被邀请招募的50位病人产生三个唾液样本,一个在早上醒来的时候在早餐前和清洁牙齿和两餐后样品60分钟后两个单独吃饭通常午餐和晚餐。从50招募患者共150个样本进行了分析使用Peptest唾胃蛋白酶。图3显示了意味着男性和女性患者的胃蛋白酶水平进入更高的研究(p< 0.0367)女性患者。pH值中扮演着重要角色在牙齿侵蚀和测试所有的pH值很重要,在研究过程中提供的唾液样本。pH值比较清醒和餐后唾液样本中存在的积极的和消极的胃蛋白酶non-erosive和腐蚀性蛀牙。

图4说明了数量的患者提供了一种唾液样本是醒来发现胃蛋白酶阳性或胃蛋白酶-患者的牙齿侵蚀相比,患者没有牙齿侵蚀。

胃蛋白酶的浓度在患者牙齿侵蚀(n= 9)是200.9 ng / ml患者,没有发现牙齿侵蚀(n= 4)胃蛋白酶浓度为311.8 ng / ml,这种差异不显著。令人惊讶的观察是有更多的患者没有唾胃蛋白酶有牙酸蚀病牙的患者相比,侵蚀和积极的胃蛋白酶。

图5举例说明了患者牙齿侵蚀和积极的胃蛋白酶和消极的胃蛋白酶后膳食样品相比,患者没有牙齿侵蚀。

胃蛋白酶平均浓度组与牙齿侵蚀145.3 ng / ml,集团没有牙齿侵蚀胃蛋白酶浓度为251.6 ng / ml (p< 0.05)。与唾液醒来胃蛋白酶样品如图4所示的餐后唾液样本数量的患者牙齿侵蚀曾积极的胃蛋白酶(n= 21)或负面的胃蛋白酶(n= 18)是相似的。

唾液pH值起着关键作用的因果因素牙齿侵蚀。pH值比较醒来和餐后唾液样本的存在积极和消极的胃蛋白酶和患者的腐蚀性和non-erosive蛀牙。

图6说明了不同患者积极的胃蛋白酶之间唾液样本(醒来n= 13)和那些没有胃蛋白酶(n= 36)。平均pH值的胃蛋白酶阳性患者的唾液pH值5.2和-胃蛋白酶意味着患者唾液pH值为6.6。胃蛋白酶阳性患者有pH值低于患者胃蛋白酶-统计差异p < 0.001。

唾液pH值没有显著差异的唾液样本醒来牙齿侵蚀(患者中n那些没有牙齿侵蚀= 38)(n= 11)(图7)。平均pH值的唾液组牙齿侵蚀pH值6.2和平均pH患者的唾液pH值6.1没有牙齿侵蚀。

在阳性患者唾液胃蛋白酶(n= 30)餐后唾液样本有一个显著(p< 0.05)低的意思是,pH值5.9,相比患者负唾胃蛋白酶(n= -20)平均pH值是6.7。胃蛋白酶阳性患者有较低的患者唾液pH值比消极的胃蛋白酶,因此类似于观察提供的唾液样本中醒来(图8)。

在餐后唾液样本,没有显著差异之间的pH患者呈现牙齿侵蚀(n= 39),pH值为6.2,在病人没有牙齿侵蚀(n= 11),pH值6.2(图9)。

在合并后的病人在清醒和餐后胃蛋白酶阳性(n= 43)和胃蛋白酶- (n= 56]唾液pH值样本有显著差异(p< 0.0001)之间的平均pH值的样本。胃蛋白酶的唾液样本平均pH值5.7和胃蛋白酶负样本平均pH值6.6。

之间没有显著差异观察患者的唾液pH值样本与牙齿侵蚀(n= 77),pH值6.2和患者没有牙齿侵蚀(n= 22),pH值6.2。

醒着的唾液胃蛋白酶浓度的平均值为235.0 ng / ml (n= 13)相比,平均餐后唾液样本胃蛋白酶浓度是175.3 ng / ml (n= 46个样本)。胃蛋白酶浓度的差异不显著。如图10所示的数据。

患者中胃蛋白酶浓度均值没有牙齿侵蚀265.7 ng / ml (n= 17个样品)和患者的牙酸蚀病的意思是胃蛋白酶浓度降低157.2 ng / ml (n= 42个样本)。有显著性差异p < 0.05。如图11所示的数据。

牙齿侵蚀的分类已经有据可查的,和早期发表的报告中描述的术语和分类,例如,在1892年由Darby[7], 1907年由米勒[8]和1923年由Pickerill [9]。牙齿侵蚀分类[10]称为外在,内在或特发性。外在侵蚀是外源性酸的结果例如空气中的酸性污染。内在侵蚀内源性酸的结果,这是高度相关的当前研究中,导致胃酸接触牙齿时,例如,返流的反胃和呕吐。最后,特发性侵蚀是来历不明的酸的结果。

唾液被描述为最重要的生物因素与牙齿侵蚀的发展[2]。牙齿侵蚀一般人群[11]大约在42%,这个比例是GERD类似报道在欧洲和美国等西方国家[12]。虽然不是每个人都与GERD一定会出现牙齿侵蚀。最近的一项审查发现的平均患病率为24%牙齿侵蚀GERD患者和平均患病率为32.5% GERD成人患者牙科侵蚀[13]。返流性疾病的常见因素,牙酸蚀病胃refluxate含有腐蚀性药物如酸和胃蛋白酶已被确认为在GERD因果,酸与牙齿侵蚀有关。不同的案例研究得出结论,病人被诊断患有GERD的风险更高发展牙科侵蚀(11、14、15)。内源性(内在)和外源性(外在)酸来源负责发病率和高患病率的增加牙齿侵蚀牙齿和相关敏感性[5]。

但是,与酸被认为发挥重要作用导致牙酸蚀病很少有研究参考胃蛋白酶与牙齿侵蚀。胃蛋白酶是一个高度积极的消化酶和存在于胃refluxate引起上消化道上皮损伤,气管和肺[16]。前一个牙科研究表明,胃蛋白酶能够完全降解的有机基质去除矿物质牙本质时沉浸在胃蛋白酶超过3天的,而人工情况(17、18)。有一个以前的研究调查的影响pepsin-hydrochloric酸溶液侵蚀牙齿的物质损失和胃蛋白酶是否影响氟化物的功效。结果是,胃蛋白酶对牙科组织损失但并没有影响改变氟化反应的疗效措施[19]。

牙齿侵蚀的GERD是一个重要的原因,定义为通过胃refluxate含有酸和胃蛋白酶进入食道。健康人的胃refluxate返回到胃蠕动刺激吞咽。相比之下GERD患者延迟酸间隙和患者牙齿侵蚀不能够清晰的酸和胃蛋白酶从食道[20]。能够很好的证明,在低pH值与酸的牙釉质脱钙反过来导致损失的牙齿结构和牙齿侵蚀。目前的研究着手建立唾胃蛋白酶在牙齿侵蚀胃蛋白酶的作用由一个非侵入性的诊断设备(Peptest、RD生物医学有限公司、英国),使胃蛋白酶的快速测定收集唾液样本(21 - 25日)。胃蛋白酶的诊断测试演示了敏感性和特异性临床验证研究(26、27)。本研究提供的证据表明,胃蛋白酶是不易与牙齿侵蚀胃蛋白酶含量较高的唾液中发现胃蛋白酶从病人牙齿侵蚀。胃蛋白酶是一个更大的分子比盐酸酸/[16][28]和太大穿透牙釉质,导致牙本质的崩溃,而酸被小容易穿透导致去矿化作用和牙齿侵蚀/衰变。还有的有趣的问题,为什么病人没有牙齿侵蚀了更高水平的牙科患者胃蛋白酶而侵蚀有负面或胃蛋白酶含量低。在第一次看到这个结果,我们推测,pH值有关。 However, our data did not support the involvement of pH as shown in our data analysis. This remains an unanswered question and will be the subject of further investigation.

主要研究的局限性是相对较低的病人数量,这项研究将会受益于招聘更多的牙科实践。本研究中使用的年龄是25到85岁但使用老年患者并不影响提供小毫升唾液样品。然而,未来的研究可能受益于招聘和评估患者在一个比较狭窄的年龄范围例如30到70岁。这项研究也会受益于确定每个病人的牙齿侵蚀水平不仅存在或不存在。

唾液样本提供通常醒来胃蛋白酶浓度高于那些提供餐后唾液样本。患者牙齿侵蚀的唾液有显著降低胃蛋白酶浓度醒来和餐后样品相比病人没有牙齿侵蚀。

我们假设,会有一个强大的唾液胃蛋白酶水平之间的联系和牙齿侵蚀和本研究的目的是要证明这一点。然而,之间没有相关性的存在牙侵蚀和胃蛋白酶的存在。

作者要感谢苏Haseltine招募患者进入研究和确保他们完全指示所有的研究过程。

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