可实现Wondfo®SARS-COV-2IgM/IgG抗体应用为快速诊断测试

后台 :突发新式corona病毒(SARS-COV-2)疾病(COVID-19)迅速遍历世界研究的目的是评价和验证性能Wondfo®侧流免疫学解析SARS-COV-2-IgG和IgM抗体Wondfo®使用荧光免疫测试所得结果作为参考诊断

素材方法97个血清样本由Sergipe/Brace的四个独立实验室收集分析Wondfo®SARS-COV-2IgM/IgG抗体测试CoVID-19阳性血清标本由光学免疫测定技术确定,并用作参考标准

结果:97个血清样本显示39(39/97)SARS-COV-2IgG正试样,33(33/97)SARS-COV-2IgM正试样和25非试样(25/97)。然而,Wondfo®IgM/IgG阳性标本和25(25/97)无试样发现结果间关系微弱Wondfo®检测和荧光测试两次测试的精度为32.08%敏感度、特性、正预测值和负预测值Wondfo®IC检测率分别为11.12%、100%、100%和25.27%再者,没有假正样确定值,而发现88.89%假负结果

结语 :上头Wondfo®IC测试失败提供快速、有效、可靠结果,似乎不是临床检测大流行日志病毒的好替代方法但是,如果快速测试的局限性为人知,可使用某些校正因子调整流行病学数据

2019年12月中国湖北省武汉市首次发现新式corona病毒暴发(SARS-COV-2)2020年5月,COVID-19在全球造成400多万人死亡约307.537 [2]多数受SARS-COV-2感染的人有温和或无症状,但一些COVID-19病人发展严重肺炎、急性呼吸困难综合症(ARDS),多机故障可演化为死[3]

充分诊断SARS-COV-2感染对确定病人治疗管理、建立感染控制协议和防止病毒传播到新社区至关重要SARS-COV-2RNA量化逆序聚合链响应分析被视为检测COVID-19疾病的金标准,但该方法的敏感度可能随感染时间和病毒负载而变化[4,5],RT-PCR则费用昂贵,因为需要特殊设备和试剂因此,有必要进行替代人工测试IgG、IgM和IgA抗体SARS-COV-2诊断由于其快速可靠的诊断测试而在COVID-19诊断中越来越重要血清测试对流行病学信息至关重要,有助于适当的锁定退出策略和疫苗开发[6,7

一种在诊断COVID-19中获得名异性测试是IgM和IGG抗病毒测试IC检测快速高通量方法诊断病毒感染,并被接受为关点测试[8]最近开发各种商业IC解析COVID-19诊断技术,这些测试用于临床环境但其有效性和临床实用性需要评估和验证适当的诊断方法必须有高度敏锐度和特性,并有各种条件优异性能[9]

因此,本项研究的目的是评价和验证本项研究的性能Wondfo®SARS-COV-2IgG/IgM抗体剖析,与荧光免疫测试所得结果比较临床检测敏感度和特征Wondfo®使用从72FI确认COVID-19病人和4个不同实验室25名负数病人采集的血液样本测量IC测试

学习设计

包括97余人用毒血从Sergipe/Braceblia实验室的病人和健康人获取的31样本Lab2实验室:25样本Lab3实验室:21样本Lab4实验室:20样本SARS-COV-2IgM或IgG样本使用荧光免疫技术诊断为阳性SARS-COV-2半自动装置iChroma2使用FIA半定量检测IgG和IgM抗体使用Borchtech(SouthKorea)采样除法COVID-19试样和非COVID-19试样使用FIACOI值,COI<0.9检测非试剂使用COI>1.1检测试剂

样本采集时间为2020年4月,用分离凝胶管内血孔穿孔,3000RPM离心10分钟,血清分离成SARS-COV-2IgM或IgG抗体分析FIA解析测试和免疫色谱测试是在制造协议后同一天采集完成的。全部Wondfo®SARS-COV-2IgM/IgG反机测试由失明运算符进行和分析装箱精度/可复制性研究有30个标本失明随机选择Wondfo®C解析复制

容积芯片需要非试剂诊断流感病毒、流感A、流感B、HIV、Epstein-bar病毒、乙型肝炎C抗体

Wondfo®侧流免疫测量检测SARS-COV-2IgM/IgG抗体Wondfo®C测试)

Wondfo®SARS-COV-2IgM/IgG抗体测试是一种生物样本中SARS-COV-2IgM/IgG抗体快速定量检测的免疫色测定SARS-COV-2IgM/IgG抗体测试使用横向流法解解析与厂商协议一致(黄州WondfoBiotech)。简言之,10微升血清标本加到样本加载区,再加80微升缓冲15分钟编译后, 病毒Igm-或IgG内阳性样本可同时显示T线(测试)和C线(控制)样本中只有C线被视为负值

$\text{准确性}=\frac{\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级}+\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{N级}}{高山市\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级}+\mathrm{F级}\mathrm{N级}+\mathrm{F级}\mathrm{P级}+\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级})}$

$\text{敏捷度}=\frac{\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级}}{高山市\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级}+\mathrm{F级}\mathrm{N级})}$

$\text{特性性}=\frac{\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{N级}}{高山市\mathrm{F级}\mathrm{P级}+\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{N级})}$

$\text{Positive predictive value}=\frac{\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级}}{高山市\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{P级}+\mathrm{F级}\mathrm{P级})}$

$\text{Negative predictive value}=\frac{\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{N级}}{高山市\mathrm{N级}\mathrm{T级}\mathrm{N级}+\mathrm{F级}\mathrm{N级})}$

哪里NTP实战数NTN实负数FP数假阳性FN虚负数

道德语句

研究经Sergipe大学研究道德委员会批准,无CAE310185220.can0546

IgM和IgGSARS-COV-2抗体可用侧流免疫色谱解析检测,快速测试目前用于诊断COVID-19病人研究中比较结果Wondfo®IC解析Wondfo®SARS-COV-2抗体测试和从荧光免疫检测中获取结果

共97个血清样本由四个独立实验室采集分析实验2:n=25Lab3:n=21实验4:n=20 通过荧光免疫技术和结果显示39(39/97)SARS-COV-2IgG正试样(COI2.2-532)33(33/97)SARS-COV-2IgM正试样(COI1.3-50)和25非试样(COI <0.9)25/97(表A),计算为74/22%SARS-COV-2IgG/IgM参考标准技术检测的正试样FIA发现用定义SARS-COV-2IgG或IgM正或负标本

后期同97样本分析Wondfo®CoVID-19IgM/IgG快速免疫色谱测试Wondfo®表A汇总了结果Wondfo®IC解析总SARS-COV-2免疫球素全部样本规模分析Wondfo®检测成功完成,因为控制区内线在试样插入磁带后15分钟迁移后清晰可见

上头Wondfo®IC结果显示,SARS-COV-2IgG/IgM抗体9中检测到97个血清样本中的9个样本(9.3%)同预期一样,所有25名非COVID-19人负数Wondfo®IC测试发现结果间关系微弱Wondfo®ISS-COV-2IgM/IgG阳性样本的9.3%和流频测试(SARS-COV-2IgM/IgG正性样本的74.22%)(表A)。表B和C表示每个样本的描述性结果并附单项数据Wondfo®测试结果比较FIA获取COI数

表D表示性能特征Wondfo®与97血清标本的荧光检测比较IC解析,并视之为参考标准两次测试的精度为32.08%敏感度、特性、正预测值和负预测值Wondfo®IC解析率分别为11.12%、100%、100%和25.27%再者,没有假正样确定值,而发现88.89%假负结果(表D)。分析显示Wondfo®逻辑解析性(数据不显示)

为了确认先前发现,使用RRT-PCR为RNA病毒阳性样本额外测试RT-PCR被认为是COVID-19诊断的金标准解析荧光检测结果显示标本为IgM试剂(SARS-COV-2IgM正数)(COI1.4),而Wondfo®IC测试同样样本检测为非试剂

SARS-COV-2病毒跟踪帮助控制流行病状况并便利诊断新病例,成为公共卫生的一个重要工具[4]适当的诊断测试对获取有效可靠结果至关重要保证实验室发现可追踪并识别病人定向、隔离和处理世卫组织当前COVID-19诊断建议显示使用分子测试SARS-COV-2病毒RNA然而,由于RT-PCR基础设施有限和缺少用品限制获取诊断测试的人数,正在开发快速血清检测法以拓展实验室测试能力并覆盖所有人群[10]线上数项快速测试基于SARS-COV-2IgM/IgG反体[811]尽管如此,为了实现帮助公众健康目标,这项测试必须是一个高价值诊断工具,敏感、快速和具体检测SARS-COV-2

Demey等使用四种不同免疫学快速测试说明,这种诊断工具在SARS-COV-2感染后检测抗体性能良好Vásárhelyi等检测IgM和IgG抗SARS-COV-2病毒的快速免疫法测试发现低效,表示该测试不应用于差分诊断corona病毒感染生物快速测试文献争议导致有必要验证目标群SARS-COV-2IgM/IgG诊断包以提高分析质量

在当前研究中,我们评价Wondfo®IC测试Wondfo®SARS-COV-2反体测试)验证由4个独立实验室进行的荧光免疫检测结果被用作参考标准分析结果商业Wondfo®IC测试包和COVID-19患者荧光测试所得结果比较上头Wondfo®C解析显示COVID-19敏感度低(11.12%)和特性高(100%),并有大量假负值结果荧光检测检测72IgG/IgM抗体样本Wondfo®取出低精度况且Wondfo®检测SARS-COV-2IgM蛋白时IC检测失败全部结果并发 表示Wondfo®IC测试对参考标准测试或RT-PCR测试没有提出良好的协议

低负预测值显示Wondfo®IC工具包检测SARS-COV-2IgM和IgG在数个样本中抗病毒感染,变得不适合在普通人群中检测COVID-19基于低敏感度和高负预测值, 我们可以建议Wondfo®IC测试显示低功能

必须指出,在本研究中,我们使用通过血孔采集的标本管分凝胶、离心机快速测试和SARS-COV-2IgM或IgG运算测试同一天完成值得记住的是样本冷却并保留数日会妨碍检测抗体采集样本后长时分析会影响免疫测试结果,因为试剂蛋白退化为了取得更好的结果,建议尽快进行免疫学解析

此外,无效Wondfo®SARS-COV-2IgG或IgM测试可与采样时间关联CoVID-19疾病有不同的感染阶段,免疫响应随疾病病理学而异[13M14]研究证明采样时间反映语法测试的敏感度和特性Imai等显示IC检测敏感度低 早期表示和无症状病人Cassaniti等[16]报告VivaDiagCOVID-19IgM/IgG快速测试显示急性病患者呈弱阳性快速测试检测到18.4%的阳性病人样本确认实时RT-PCR对COVID-19呈阳性冲突可能与采样时间相关,因为它反映疾病的演化Pan等8表示IC检测敏感度随疾病增量变化,作者显示SARS-COV-2IgM或IgG初级正率相对较低,在疾病演化期间逐步增加受感染阶段反映采样时间分析 推导出免疫色谱分析结果

这项研究有一些局限性血清样本数和快速测试仅使用一种血清方法作为抗体存在的参考此外,正负样本分布可能限制研究范围。

正因如此Wondfo®IC测试失败提供快速、有效可靠结果,似乎不是临床检测大流行日志病毒的好替代方法但是,如果快速测试的局限性为人知,可使用某些校正因子调整流行病学数据可能需要进一步研究来确定该工具箱在不同环境和社区的实用性深入理解低敏感度测试背后的原因,未来的研究设计应调查样本定时和采集结果干扰的可能性

这项工作得到了来自巴西所有机构FAPITEC-SE、CNPq和CAPES的赠款支持。感谢Sergipe州卫生局向SOLIM、CLIMED、CIruGIA实验室提供跨实验室评价这项工作得到了巴西机构CAPES、CNPq和FAPITEC/SE赠款支持。并感谢所有医生和前线卫生工作者及其他员工为面对COVID-19所付出的如此多努力。

贡献

LPB、LQJ和ASA对研究的构思和设计作出了贡献。LPB、MGBO、DR和KAS帮助获取数据和分析数据LPB、LQJ和ASA帮助分析和解读数据LH、LPB和LQJ起草文章或关键修改重要知识内容LPB、MGBO、DR、LH、LQJ和ASA核准提交版本

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