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提交：2019年10月29日批准:2019年11月8日|出版：2019年11月11日

如何引用这篇文章：等。SDS-page分析MDS与年轻、老年患者血浆蛋白的相关性。Int J Bone Marrow Res. 2019;2: 087 - 088。

内政部：10.29328 / journal.ijbmr.1001009

奥奇德：orcid.org/0000-0001-9668-1514

版权许可证：©2019 Silva ND，等。这是一篇在知识共享署名金博宝app体育许可下发布的开放存取的文章，它允许在任何媒体上无限制地使用、传播和复制，只要原始作品被适当地引用。

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SDS-page检测MDS患者、青年和老年患者血浆蛋白的相关性

纳撒尼尔利·德利马·席尔瓦1，丹尼洛·诺布雷1， Josiel Nascimento dos Santos2，Márcia Santos Rezende1，Lúcio Henrique Sousa Pinheiro1，卡洛斯·阿瑟·卡多索·阿尔梅达2还有杜尔塞·玛尔塔·希米格尔1*

1塞吉佩联邦大学药学系，São Cristóvão，巴西塞吉佩
2巴西阿拉贡联邦大学药物科学研究所，Alagoas

*通讯地址：Dulce Marta Schimieguel, Sergipe联邦大学药学系，São Cristóvão, Sergipe，巴西，Tel: +55 79 3194-6319;电子邮件:dulcemarta@hotmail.com;hematox2017@hotmail.com

摘要
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简介:骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性克隆性造血恶性肿瘤，其特征为进行性细胞减少、造血功能低下、骨髓细胞增生和转化为急性髓系白血病（AML）。

目标：通过SDS-Page鉴定MDS患者和两个健康对照组（年轻组和老年组）的血浆蛋白。

方法：本研究采用08名健康年轻人、08名健康老年人和08名MDS患者的血浆。蛋白分馏、沉淀，SDS-PAGE凝胶分析，柯马西亮蓝染色，扫描和条带分析。

结果：在20%的组分和上清液中都可以鉴定出各组中差异表达的蛋白质。那些已经显示出一些临床相关性的。纤维连接蛋白仅在年轻对照组中高表达。α2-巨球蛋白也在两个对照组中表达，但在MDS组中不表达。结合珠蛋白仅在老年对照组和SMD组高表达。

结论:血浆蛋白表达可作为MDS的生物标志物，在衰老和血液恶性肿瘤的发展过程中发挥关键作用。

介绍
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最近，医学在治疗多种癌症方面取得了巨大进展。另一方面，MDS和AML仍然是预后最差的血液系统恶性肿瘤之一。因此，老年MDS患者仍然存在许多问题，其中年龄是主要预后因素之一[1,2]。

大多数患者在60岁时确诊，发病率最高的是70至75岁左右。年龄是多种癌症发生的主要因素之一，如MDS。尽管如此，其他风险因素可能会随着年龄的增长而评估，如环境、细胞和遗传因素[3]。

MDS的诊断包括外周血和骨髓的定量和定性分析。采用骨髓活检、细胞遗传学、分子分析和流式细胞术免疫分型进行诊断。然而，即使是最专业的专家[4]也很难解释MDS的诊断。

与本病不同生物学功能相关的分子标记有多种，但有效的蛋白质很少。事实上，已经对几个不同MDS亚群的血浆蛋白质组进行了研究，并与健康献血者的血浆蛋白质组进行了比较，但结果数据还不够清楚，不足以对诊断性生物标志物[5]的选择和提出有用。

材料和方法
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Sergipe联邦大学人类伦理委员会研究批准的方案:3.225.938。研究对象24名，均为女性，分为3组:健康青年08名，年龄在20 ~ 30岁，称为青年组;08名健康老年人，年龄60 ~ 80岁，命名为老年组;08名SMD患者，年龄19 ~ 86岁，命名为SMD组。

从所有受试者和对照组中，收集10毫升EDTA管中的血液。分离血浆并在-80°C下冷冻，直至分析。蛋白质被分离和沉淀。20%的馏分和上清液用于SDS-PAGE凝胶分析。对样品进行定量[6]，（Bradford法），并将30纳克施加到10%聚丙烯酰胺凝胶上。凝胶在100v下运行1,5h，然后用Comassie亮蓝G-250 a 0,2%染色，扫描并分析条带。

后果
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SDS-PAGE蛋白质筛选显示了相关结果，表明在所分析的03组血浆中以不同方式表达的蛋白质的鉴定是可能的。

在20%的组分和上清液中都可以鉴定出各组中差异表达的蛋白质。那些已经显示出一些临床相关性的。纤维连接蛋白仅在年轻对照组中高表达。α2-巨球蛋白也在两个对照组中表达，但在MDS组中不表达。根据图1，结合珠蛋白仅在老年对照组和MDS组中高表达。


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图1:考马斯亮蓝染色SDS-PAGE凝胶。青年沉淀:青年个体血浆池，20% (NH4) 2SO4沉淀;年轻上清:年轻个体血浆池，20% (NH4) 2SO4沉淀后留下上清;MDS沉淀:疑似MDS患者血浆池，20% (NH4) 2SO4沉淀;MDS上清:疑似MDS患者血浆池，20% (NH4)O4沉淀后残留上清;老年沉淀:老年个体血浆池，20%沉淀(NH4) 2SO4;老年上清:老年受试者血浆池，20% (NH4) 2SO4沉淀后留下的上清;年轻纯血浆:未加入(NH4) 2SO4的年轻个体的血浆池。

讨论
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纤维连接蛋白是一种血浆蛋白，通常与多种不同的生物学功能相关，包括细胞粘附、生长、迁移和分化，这证明其在年轻人中的高表达比在老年人中的高表达更为合理。在癌症和其他病理情况下，纤维连接蛋白表达减少，降解增加，这些结果也显示了这一点。α2-巨球蛋白除了具有多种功能外，还是主要的血浆抗蛋白酶之一。它还通过与多种细胞因子和/或受体结合在炎症过程中发挥重要作用，并与衰老和癌症相关。这可能解释了这项研究的结果。结合珠蛋白是一种四聚体血浆蛋白，以高亲和力与血红蛋白结合。它具有临床重要性，可作为诊断和预后标志物，因为在各种病理条件下，结合珠蛋白水平升高/降低。最近，据报道，结合珠蛋白的增加与衰老之间存在正相关关系，与成人的参考值相比，年轻人的结合珠蛋白浓度较低。结果与我们在这里发现的结果相似。

结论
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sds - page凝胶电泳可作为一种廉价而强大的工具，用于区分健康和MDS患者血浆组分和沉淀中的蛋白表达;有些蛋白质可能在衰老和癌症的过程中发挥关键作用，因此可能与MDS的发展有关。然而，为了得出这个结论，还需要进行进一步的研究。

致谢
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作者感谢来自Seligpe E联邦大学医院的专业人员，他们参与了这项研究。

金融支持
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本研究由Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq (Proc. Proc. 306464/2016-0和423833/2018-9)和Fundação de Apoio à Pesquisa e à Inovação Tecnológica do Estado de Sergipe (FAPITEC/SE)资助。

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  1. 老年人骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病。Eur J Intern Med. 2018;58: 28-32。PubMed:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30527920
  2. DeZern AE、Malcovati L、Ebert BL.CHIP、CCUS和其他首字母缩写词：定义、含义和对实践的影响。Am Soc临床教学手册。2019; 39: 400-410. PubMed：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31099654
  3. 骨髓增生异常综合征的诊断和预后。Ann Lab Med. 2017;37: 465 - 474。PubMed:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28840983
  4. 王志强，王志强，王志强，等。骨髓增生异常综合征中驱动基因突变的临床和生物学意义。血。2013;122: 3616 - 3627。PubMed:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24030381
  5. 硫酸铵对血浆蛋白质组的部分沉淀:白血病和地中海贫血的案例研究。生物信息学杂志。2012;5.
  6. 布拉德福德。一种利用蛋白质染料结合原理快速、灵敏地定量微克量蛋白质的方法。分析生物化学。1976; 72: 248-254. PubMed：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/942051